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農(nóng)藥殘留的檢測(cè)在紫外可見分光光度計(jì)、分光光度計(jì)檢測(cè)方面，已經(jīng)取得了很大進(jìn)步，紫外可見分光光度計(jì)靈敏度的提高，穩(wěn)定性的提高給予農(nóng)藥殘留的檢測(cè)能力、檢測(cè)限、覆蓋范圍等帶來(lái)了非常大的提升。（如雙光束紫外可見分光光度計(jì)UV1901PC）具備雙光束光學(xué)系統(tǒng)，參比和樣品可同時(shí)放入，提高了分析效率和準(zhǔn)確性。有利于加強(qiáng)農(nóng)藥殘留監(jiān)控力度。同時(shí)UV1901PC雙光束紫外可見分光光度計(jì)具備單機(jī)掃描（隨開機(jī)，隨掃描），自動(dòng)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（一種殘留元素，只需做一次標(biāo)準(zhǔn)曲線，可儲(chǔ)存于紫外可見分光光度計(jì)本機(jī)中，使用時(shí)調(diào)出。方便實(shí)用），單機(jī)多波長(zhǎng)（一個(gè)樣品同時(shí)測(cè)出不同波長(zhǎng)的數(shù)值。減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間和操作步驟），動(dòng)力學(xué)等功能（觀察樣品時(shí)間上的變化，可長(zhǎng)達(dá)10個(gè)小時(shí)）。

 本方法適用于蔬菜、水果、相應(yīng)食物、水及中毒殘留物中有機(jī)類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的檢測(cè)。

一定條件中，氨基甲酸酯類農(nóng)藥、有機(jī)磷對(duì)膽堿酯酶有抑制作用，抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正比。用分光光度計(jì)測(cè)農(nóng)殘的方法其實(shí)是利用酶催化乙酰膽堿水解產(chǎn)物與顯色劑生成黃色物質(zhì)，其物質(zhì)在紫外412nm波長(zhǎng)處有吸收，可以利用紫外可見分光光度計(jì)測(cè)定其吸光度隨時(shí)間的變化值（使用UV1901PC紫外可見分光光度計(jì)動(dòng)力學(xué)功能操作簡(jiǎn)便）得出蔬菜中含有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)殘留量的情況。

主要儀器：

分光光度計(jì)/紫外可見分光光度計(jì)，電子天平，移液槍及配套管嘴，冰箱，超聲波提取儀/萃取儀/處理器（FS-600N）

試劑

PH8.0緩沖溶液  分別稱取11.9g無(wú)水磷酸氫二鉀和3.2g磷酸二氫鉀，溶解于1000ml蒸餾水中。

顯色劑    分別稱取160mg5,5-二硫代2-（硝基苯甲酸）（DTNB）15.6mg碳酸氫鈉，溶解于20ml緩沖溶液中，4℃冰箱中保存。

底物   稱取125mg碘化硫代丁酰膽堿，溶解于15ml緩沖液中，搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆?。保存期不超過兩周。

丁/乙酰膽堿酯酶 根據(jù)酶的活性情況，用緩沖液溶解，3min內(nèi)的吸光度變化控制在0.4~0.8。搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

操作步驟

樣品處理  選取有代表性的蔬菜樣品，沖洗掉表明泥土，剪成1cm左右見方碎片，取樣品1g，放入燒杯或提取瓶中，加入5ml緩沖溶液，手搖振蕩1~2Min,或超聲波振蕩30s,浸出提取液，靜置3~5min，待用。

對(duì)照溶液測(cè)試  先于試管中加入50ul酶液和50ul顯色劑，再加入2.5ml緩沖溶液，搖勻后于37℃放置15min，加入50ul底物搖勻，此時(shí)開始反應(yīng)并顯色，要立即放入分光光度計(jì)/紫外可見分光光度計(jì)自動(dòng)聯(lián)樣品池中，記錄反應(yīng)3min時(shí)的吸光度。

樣品溶液測(cè)試  先于試管中加入50ul酶液和50ul顯色劑，再加入2.5mL樣品提取液，其他操作與對(duì)照溶液測(cè)試相同，記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值。

分光光度計(jì)法測(cè)農(nóng)藥殘留主要優(yōu)點(diǎn)：穩(wěn)定性好，靈敏性高。